清华大学环境生物技术实验室 PCR 产物回收试剂盒说明书

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清华大学环境生物技术实验室 PCR 产物回收试剂盒说明书

本试剂盒采用磁珠法,用于从 PCR 反应体系中快速纯化 DNA 片段。该试剂盒具有以下特点:

高纯度:磁珠表面经过特殊处理,可有效吸附 PCR 产物中的 DNA,去除引物、dNTPs 和其他杂质,获得高纯度的 DNA 片段。

快速高效:操作简单,只需简单的离心和洗涤步骤,即可在 30 分钟内完成 DNA 纯化。

广泛适用:适用于各种 PCR 反应体系,包括常规 PCR、嵌合 PCR、定量 PCR 和高保真 PCR。

产品组成

PCR 产物回收试剂 A:200 ml

PCR 产物回收试剂 B:10 ml

磁珠:10 ml

操作步骤

1. 加入磁珠:向 PCR 反应体系中加入等体积的 PCR 产物回收试剂 A,充分混匀。然后,加入 1.8 倍体积的 PCR 产物回收试剂 B,再次充分混匀。

2. 磁珠吸附:将混合物置于磁力架上 5 分钟,磁珠会吸附 PCR 产物中的 DNA。

3. 洗涤:弃去上清液,向磁珠加入 70% 乙醇,充分混匀,置于磁力架上 30 秒,弃去上清液。重复此步骤一次。

4. 洗涤:向磁珠加入无水乙醇,充分混匀,置于磁力架上 30 秒,弃去上清液。

5. 干燥:将磁珠置于室温下干燥 5 分钟。

6. 溶解 DNA:向磁珠加入适当体积的灭菌水或 TE 缓冲液,充分混匀,置于磁力架上 2 分钟,上清液即为纯化的 DNA。

应用举例

该试剂盒可广泛用于各种 PCR 产物纯化应用,包括:

克隆:纯化的 PCR 产物可直接用于克隆实验,无需额外的纯化步骤。

测序:纯化的 PCR 产物可直接用于测序,无需担心杂质干扰。

杂交:纯化的 PCR 产物可用于杂交实验,如 Southern 杂交和 Northern 杂交。

芯片检测:纯化的 PCR 产物可用于基因芯片检测,如基因表达谱检测和 SNP 检测。

注意要点

使用前请充分混匀试剂。

洗涤时,请确保磁珠完全浸泡在液体中。

溶解 DNA 时,请避免过度混匀,以免剪切 DNA 片段。

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